Otthon / Termék / Fehérje alkalmazások / Proteomika támogatás / Krio-elektronmikroszkópia szolgáltatás

Krio-elektronmikroszkópia szolgáltatás

A kriogén elektronmikroszkópia (krio-EM) egy élvonalbeli technika a szerkezeti biológia területén, amely lehetővé teszi a tudósok számára, hogy vizualizálják a biológiai makromolekulák pontos részleteit. A krio-EM transzmissziós elektronmikroszkópián alapul, közel atomi felbontásban. Növekvő piaci kereslet számos biomedikai alkalmazásban, például gyógyszerfejlesztésben, antitestekben, vakcinákban és így tovább.

Kérjen ingyenes árajánlatot

Krio-EM érték Strukturális megoldások Egyablakos munkafolyamat Megbízható platformok Miért válasszon minket

A krio-EM előnyei a röntgenkristályográfiához képest

Annak ellenére, hogy a röntgendiffrakció még mindig kissé nagyobb felbontást érhet el, a krio-EM jelentős előnyökkel bír:

Minimális mennyiségű mintavétel szükséges.
Nem kell kristályosodásra.
Nincs szükség szinkrotronforrásra röntgensugárzásra.
A közel őshonos állam megőrzése.
A rugalmasság értékelése.
Alkalmas olyan részecskékre, amelyeket nehéz kristályosítani, például membránfehérjékhez vagy supramolekuláris összeállításokhoz (pl. vírusokhoz).
A konformációk heterogenitása egyetlen példányban feloldható.
Alacsony tisztasági szint elfogadott.

Az EMDB bejegyzéseinek exponenciális növekedése:

Strukturális megoldások

Mintaalkalmassági értékelés – negatív folt

Mielőtt fontos mikroszkópos erőforrásokat alkalmaznánk krio-EM-ben, a negatív színvizsgálatot általában szobahőmérsékleten és alacsony feszültségen végzik. Ez a lépés lehetővé teszi a mintaalkalmasság értékelését, beleértve a homogenitást, aggregációt, részecske morfológiáját, méretét és eloszlását, nagy elektronsűrűségű festő anyag használatával.

A negatív festés kritikus minőségellenőrzési lépésként szolgál annak értékelésére, hogy a minta megfelelő-e a későbbi cryo-EM adatgyűjtéshez.

Nagy felbontású szerkezetmeghatározás – Egyetlen részecskeelemzés (SPA)

A krio-EM adatgyűjtés általában körülbelül 10⁴-10⁶ egyedi kétdimenziós vetítést generál, amelyeket különböző orientációban rögzítenek. Ezeket a vetítéseket számítási szempontból igazítják és egy képfeldolgozó munkafolyamaton keresztül osztályozzák, hogy háromdimenziós sűrűségi térképet rekonstruáljanak szubnanometrikus vagy közel atomi felbontásban.

Ezt követően egy atommodellt építenek, finomítanak és validálnak a rekonstruált sűrűségi térképen belül, amely strukturális betekintést nyújt a vizsgált biológiai makromolekula funkcionális mechanizmusaiba.

Helyszíni szerkezeti elemzés – krio-elektrontomográfia (Cryo-ET)

A krioelektrontomográfia lehetővé teszi a biológiai struktúrák háromdimenziós vizualizációját azok eredeti sejtes vagy vírusos környezetében. Ez a megközelítés különösen alkalmas nagy makromolekuláris összeállítások, membránhoz kapcsolódó komplexumok és vírusfertőzési mechanizmusok tanulmányozására, mivel térbeli és szervezeti információkat kínál, amelyeket egyrészecskes módszerek nem érnek el.

Szolgáltatási munkafolyamat

Projektkonzultáció → NDA aláírása, → szolgáltatási szerződés igazolása, → minta fogadása, → minőségellenőrzés, →negatív foltszűrés, → krio-EM adatgyűjtés → adatfeldolgozás → jelentés leadása.

Adatok és eredmények

Teljes adatelérhetőség biztosított a projekt életciklusa során. A kézbesített anyagok között szerepelnek nyers krio-EM filmek nyereséges referenciafájlokkal, köztes adatfájlok az adatfeldolgozás különböző szakaszaiban, végleges háromdimenziós sűrűségi térképek felbontás és minőségi mutatókkal, atomkoordináta-modellek, ahol alkalmazható, valamint keresztvalidációs jelentések, például MolProbity értékelések.

Minden adat hordozható tárolóeszközökön vagy biztonságos felhőalapú platformokon keresztül érhető el.

Három fő berendezés

Krio-EM szolgáltatásainkat a csúcstechnológiás műszerekkel felszerelt tudományos kutatóplatformokhoz való hozzáférés támogatja.

Elérhető rendszerek a következők Talos L120C G2, egy belépő szintű transzmissziós elektronmikroszkópia és krio-EM szűrési platform; Glaciers 2, egy 200 kV-os munkaló-EM rendszer, amelyet rutinszerű egyrészecske- és tomográfiai munkafolyamatokra optimalizáltak; és Titan Krios G4, egy zászlóshajó 300 kV-os krio-EM platform, amely maximális stabilitásra, automatizálásra, áteresztőképességre és felbontási potenciálra van tervezve.

Ezek a platformok együtt támogatják a krio-rács szűrést, az egyrészecske-elemzést, a krioelektrontomográfiát és a fejlett módszerfejlesztést a szerkezetbiológiai alkalmazások széles körében.

Miért Longlight?

Értékes és érett tapasztalatot kínálunk a krioelektronmikroszkópiában a csúcskategóriás tudományos kutatási platformokhoz való hozzáféréssel, valamint iparági szakértőkkel és tudományos tanácsadókkal való együttműködéssel. Szolgáltatásaink a teljes átláthatóságot és az adatküldés teljességét hangsúlyozzák, lefedve a nyers adatokat, köztes feldolgozó fájlokat, végső sűrűségi térképeket, atommodelleket és validációs jelentéseket.

Fejlett műszerrendszer, tapasztalt adatfeldolgozási munkafolyamatok és kiegyensúlyozott szállítási idővonalak ötvével megbízható, magas színvonalú krio-EM szerkezeti megoldásokat kínálunk, amelyek a különböző kutatási igényekhez szabottak.

Gyakran Ismételt Kérdések.

1. kérdés: Mennyi mintára van szükségük az ügyfeleknek az előkészítéshez?

Negatív folt:

minimális koncentráció ~1 g/L

minimális térfogat ~100 μL.

SPA oldható fehérjékkel:

minimális koncentráció ~1 g/L

minimális térfogat ~100μL.

SPA membránfehérjékkel:

minimális koncentráció ~1 g/L

minimális térfogat ~100μL.

szükség esetén megvitatható és módosítható

K2: Mik a mintapufferhez szükséges követelmények?

pH tartomány: 6,0-8,5
Sókoncentráció <200 mM
alacsony glicerol (mennyi? doi: 10,1107/S2053230X24002553)
alacsony azide (mennyi? hiányzik a támogató hivatkozás)

K3: Mi a tipikus szolgáltatási folyamat?

Projektkonzultáció → NDA aláírása, → szolgáltatási szerződés igazolása, → minta átvétele, → minőségellenőrzés → negatív folt → adatgyűjtés → adatfeldolgozás → jelentés kiadása.

4. kérdés: Mennyi az átlagos kézbesítési idő?

Negatív festés: 1-2 hét.
SPA, előzetes eredmények: 6-8 hét.
SPA, nagy felbontású modell: 2-3 hónap.

ChIP-seq

A ChIP a DNS és a fehérjék közötti kölcsönhatást vizsgálja, a ChIP-seq-et pedig a következő generációs szekvenálással kombinálják, hogy kimutassák a genomban azokat a DNS-helyeket, amelyek specifikus transzkripciós faktorokhoz/hisztonokhoz kötődnek, amelyet a fehérjék és a kromatin közötti kölcsönhatás tanulmányozására használnak.

Genomika

A Longlight a molekuláris diagnózisra és a molekuláris biológiára összpontosított, piacra dobtunk néhány NGS-hez kapcsolódó műszert és reagens fogyóeszközt, főleg a fókuszált ultrahangos készüléket, elkötelezettek voltak a genomika fejlesztésének előmozdítása mellett, hogy jobban szolgálják az emberi orvosi ügyet.

Fogyóeszközök és készletek

A Longlight különböző típusú előregyártott agaróz gélt, nukleinsav-tisztítót, Qubit csövet, nukleinsav-extrakciós készleteket és könyvtár-előkészítő készleteket kínál. Eközben ezek a termékek széles körben felhasználhatók tudományos alapkutatásokban, biogyógyszerekben és egyéb alkalmazási forgatókönyvekben.