Nehezen lízizálható mikrobák előkészítése ultrahangos zavaró berendezésekkel

A gyenge és bizonytalan mikrobiális fehérje spektrum a minta előkészítésétől kezdhet. Néhány mikroorganizmus nem alkalmas a normál módszerrel történő kinyerésre, és csak kis mennyiségű fehérjét adnak a hasznos MALDI-TOF eredményhez. Ha az előkészítő lépést nem végzik el, az újabb elemzés ugyanazt a problémát okozhatja.

Ez a cikk kiemeli a mikrobiológiai laboratóriumok igényeit, ahol nehezen lízhető minták, valamint a Longlight BoFU-80 fókuszált ultrahangátora is felmerül. Feltárja a zárt csős ultrahangos zavar rétegét, értékeli annak hatását az extrakcióra, és laboratórium beállítja a rutin módszerbe.

Kezdjük a Azonosítás Szűk keresztmetszet

A megszakítási lépés bevezetése előtt ismerje fel azokat a mintákat, amelyek nem működnek a jelenlegi módszerrel. Írd fel az organizmus csoportját, a felkészítés módját, a felhasznált anyagmennyiséget és a lefelé irányuló elemzés eredményét. Ez alapot ad a labornak az új munkafolyamattal való összehasonlításhoz.

A BoFU-80 termékoldalán olyan kihívásokkal teli élőlényekről beszélnek, mint a mikobaktériumok vagy filamentos gombák, amikor a fehérjekivonásról beszélnek a MALDI-TOF azonosításhoz. A mikrobiológiai szakemberek, akik a minták előkészítését vizsgálják, ezt a berendezést relevánsabb célközönségnek tekintik, mint egy laboratóriumot, amely általános célú ultrahangos tisztítót vizsgál.

Ismerkedj a BoFU-80 változásaival.

A BoFU-80 egy fókuszált ultrahangos készülék, amely ultrahangenergiát juttatja a zárt csövekben tárolt mintáknak, anélkül, hogy közvetlen érintkezés lenne a szonda és a mintavétel között. A mintát az ultrahangos feldolgozás során zárt tartályban tárolják, így nincs szükség arra, hogy a műszer minden feldolgozandó mintába szondát helyezzen. Ezt nevezik "kontaktás nélküli folyamatnak akusztikus közegben", ahogy azt Longlight leírja.

A fókuszált ultrahang javíthatja a mikrobiális sejtek szétesését és elősegítheti a fehérjekivonást, különösen olyan élőlényeknél, ahol viszonylag az ultrahangzás után a kezelés utáni eredmények alapján kell értékelni: az előkészített minta elérhető fehérjeprofilja és az eredmények replikálásának képessége. Ha a zavar látható, az nem feltétlenül jelenti azt, hogy a későbbi azonosítás javult.

Írd meg, hogyan helyezzük el a lépést egy jóváhagyott laboratóriumi módszeren belül

Az ultrahangos kezelés a mintakészítés egyik lépése, és nem szabad a laboratórium specifikus szervezetkezelési igényei helyett alkalmazni. A vizsgálat előtt győződjön meg róla, hogy az érintett személyzet, a tartály és eljárások azonosítják. Tartsák fenn a laboratóriumban jóváhagyott előkészítési és későbbi elemzési módszert.

Ez fontos a zárt csövek esetében. A zárt cső kialakítás minimalizálja a csőnyílásokat az ultrahangos lépés során; azonban a mintát nem szabad "biztonságosnak kezelhetőnek" nevezni, és nem szabad azt javasolni, hogy a zárt cső kialakítás megszüntetné a szükséges egyéb vezérlők szükségességét. A Longlight munkafolyamata, BoFU-80, tartalmaz rövidített ismétlődő nyitást funkcióként.

Csöv ellenőrzése és Mintabeállítás.

A fókuszált ultrahangos rendszer az edénytől és az engedélyezett konfigurációban használt akusztikus útvonaltól függ. Érdeklődjön a kívánt felhasználásra elfogadott csövekről, mintamennyiségekről és kivonókról. Ellenőrizd ezeket az adatokat, mielőtt egy másik tartályba helyeznéd a létrehozott módszert.

Longlight BoFU-Tube gyöngyök BoFU-sorozatú mintafeldolgozáshoz, és több csőkötetet is tartalmaz. Említik a sejtlízist, de a laboratóriumnak felül kell vizsgálnia a BoFU-80 mikrobiális előkészítéshez javasolt cella- és kiegészítő felszerelést.

Beszélj meg Lefelé Eredmény az értékelés szempontjából.

Hasznos vizsgálat a meglévő előkészítés és a BoFU-80 segítségével végzett előkészítés összehasonlítása, egy kölcsönösen elfogadott értékelési terv alapján. Biztosítsuk, hogy a mintacsoportok és az alsó szintű elemzési kritériumok ugyanazok. Dokumentáljuk, hogy az egyes előkészületek eredményei értelmezhetők-e, ismételhetőek-e és a további kezelési idő.

Ne támaszkodj egyetlen jó azonosítóra az általános teljesítmény mérőszámaként. Használj megfelelő, kihívást jelentő példákat és elegendő ismétlést a presztízisek közötti eltérések bizonyításához. Ha a laboratórium több szervezetcsoportot kezel, értékelje külön az egyes csoportokat – egy validált készítmény nem alkalmazható automatikusan minden csoportra.

Vegyék be beszámoló Idő a teljes munkafolyamatban

Longlight szerint a BoFU-80 körülbelül 60 másodperc alatt képes végigcsinálni az ultrahangos eljárást, a teljes minta előkezelési munkafolyamata pedig a megadott alkalmazási feltételek mellett kevesebb mint öt percet vesz igénybe. Ezek a gyártó által adott konkrét alkalmazás leírásai, és NEM garantálják, hogy egy adott laboratóriumi módszer meddig tart.

Értékeléskor az indulástól az első használható lefelé vezető termékig terjedő idő. Hozzáadjuk a beállítást, az ultrahangos lépést, az összes többi előkészítési lépést, és ismétléseket a végleges elemzés miatt. Ez azt jelzi, hogy a berendezés valódi szűk keresztmetszetet szüntet-e meg, vagy egyszerűen csak egy lépés idejét csökkenti.

Nézd meg a Ismétlődőség és a minta állapota.

Írd meg a kiválasztott programot, valamint a megfelelő mintát és csőbeállítást minden kísérlethez. A folyamatos bemeneti anyag és kezelés megkönnyíti a fehérjeprofilok különbségeinek értelmezését. Eltérő eredmények esetén ellenőrizd az összes előkészítést, mielőtt bármilyen ultrahangos beállítást megváltoztatna.

Longlight szerint a BoFU sorozat feldolgozási környezete szabályozott, és fókuszált energiát alkalmaz a feldolgozás során. Ezek mind olyan jellemzők, amelyek támogatják a módszerfejlesztést, de a labornak saját elfogadási kritériumokat kell alkalmazniuk a minta- és elemzési rendszerre.

Írj egy Módszer amit a Staff követhet

Ha egy vizsgálat sikeres és megfelel a laboratóriumi kritériumoknak, rögzítse az engedélyezett kört, amely tartalmazza a felhasználásra alkalmas mintacsoportokat, kompatibilis csöveket, mintaelőkészítési sorrendet, berendezésbeállításokat, ellenőrzéseket és eredmények értelmezését. Tájékoztassák a személyzetet arról, mit kell tenni, ha egy előkészítés meghibásodik vagy nem egyértelmű eredményt hoz.

A fogyóeszközök dokumentálása a rutin karbantartás igényei és felelősségei is. Az írásos eljárásnak lehetővé kell tennie, hogy egy másik képzett operátor következetesen készítse elő a mintákat anélkül, hogy az eredeti bemutató jegyzeteire hagyatkozna.

Ha igen Érdeklődik Egy adott alkalmazásban kérj egy példányt, hogy mutassuk be egyet.

Mindig írd meg a keresést megfontolt szervezetekcsoportot és az aktuális azonosítási folyamat nem megfelelő magyarázatát – ne feltételezze, hogy egyetlen beállítás minden mintánál működik. Érdeklődjön a BoFU-80 tervezett alkalmazásához javasolt konfigurációról (csövek és demonstrációs kritériumok).

A fent említett követelményeket a Longlight segítségével nyújtsd be Kapcsolatfelvételi oldal, majd hasonlítsa össze a javasolt beállítást a labor által jóváhagyott eljárásokkal és az alóbb eredményekkel. A vásárlási specifikációnak tartalmaznia kell az összes tesztelt módszert, valamint a fogyókeszközöket.

Következtetés

Kihívást jelentő mikrobiális mintáknál az ultrahangos zavaró berendezéseket annak megfelelően kell értékelni, hogy mennyire képesek jó minőséget és következetet nyújtani a következő analitikai lépéshez. Olyan helyzetekben, amikor a kivonás az azonosítás korlátja, a BoFU-80 egy fókuszáltabb, zárt csős megközelítést nyújthat, amelyet érdemes megfontolni. Hogy rutinmunkában kell-e lennie, egy reprezentált vizsgálat és jól meghatározott módszer határozza meg.

GYIK

1. kérdés. A BoFU-80 hagyományos szonda-szonikátor?

Nem. A BoFU-80 fókuszáló, érintésmentes ultrahangátor. Akusztikus energiát juttatja a mintáknak akusztikus kapcsolódási közegen keresztül, anélkül, hogy közvetlenül a mintába helyeznénk a próbát.

K2. Megszüntetik-e a zárt csős munkafolyamatok a laboratóriumi biobiztonsági óvintézkedések szükségességét?

Nem. A zárt csős feldolgozás csökkentheti a kezelési és expozíció kockázatait, de nem helyettesíti az élőlényspecifikus biobiztonsági intézkedéseket, a konstatisztálási eljárásokat vagy a validált mintakezelési protokollokat.

K3. Hogyan lehet a legjobban tesztelni a felszerelést?

Hasonlítsa össze a reprezentált készítményeket a laboratórium lefelé vezető eredménykritériumai alapján. Értékelje nemcsak az ultrahangozás idejét, hanem a felkészülés reprodukálhatóságát és az összes szükséges időt is, amely egy használható azonosítási eredmény megszerzéséhez szükséges.

K4. Van-e egyetlen zavaró technika, amelyet minden mikroorganizmuson alkalmazni lehetne?

Ne feltételezze ezt. Biztosítsuk, hogy a módszer minden mintacsoportra érvényesüljön az engedélyezési területen belül.

K5. Hogyan ellenőrizheti a labor a problémák?
Használja a laboratórium lefelé irányuló eredménykritériumait az előkészített minták összehasonlításához. Győződjön meg róla, hogy a módszer ismételhető eredményeket ad reprezentatív mintákon.