Mi teszi egy ultrahangkészüléket ideálissá alacsony hőmérsékletű feldolgozáshoz?

Sok modern laboratóriumban az ultrahangmű elengedhetetlenné vált. Fókuszált ultrahangú energiát használ sejtek széttörésére, DNS darabokra tételére és összetett biológiai minták előkészítésére. Ezt a következő generációs szekvenálási munkafolyamatokban, proteomikai kutatásokban és FFPE szövetfeldolgozásban fogod látni klinikai vizsgálatokhoz. Ezek a műszerek segítenek a tudósoknak precíz, ismételhető mintakészítést elérni kézi találgatás nélkül. De miért ragaszkodik most annyi kutató az alacsony hőmérsékletű ultrahangozáshoz – és mi teszi igazán egy rendszert kiemelkedővé a másiktól? Itt válik érdekessé a történet.

Miért kritikus a hőmérséklet-szabályozás fvagy Modern Sample Prep

Bárki, aki genomika vagy proteomika területén dolgozik, tudja, hogy a mintakészítés sikert vagy sikert jelenthet egy projektben. Egy kis, észrevétlen hőmérséklet-ugrás a szonikáció során csendben visszafordíthatja az órákig tartó gondos felfelé tartó munkát.

Egy enyhe hőnövekedés a következőképpen előfordulhat:

✅DNS- és RNS-töredékek törése kontrollálatlan módon

✅Károsítják a fehérjéket és enzimeket

✅Vezess be a variációt, amely csak akkor jelenik meg, ha a végső adatokat nézzük meg

A hagyományos vízfürdő vagy szondához alapuló szonikátorok rontanak ezzel. Hozzáadod a jeget, megállítod a futást, áthelyezed a csöveket egy másik beállításba. Ezekkel a plusz lépésekkel is gyakran idővel a hőmérséklet elcsúszik. A töredékméret elkezd változni, a tételről adásra változik, és a hibakeresés rutinná válik.

(FFPE szöveti proteomok térbeli megoldott elemzése kvantitatív tömegspektrometriával | Természeti protokollok)

• Az ábra egy proteomikai munkafolyamatot ábrázol a szövetmintákhoz. A szövetblokkokat metszedik, és az érdekes területeket lézeres befogó mikrodisszekcióval vagy kézi makrodisszekcióval izolálják. Az anyagot csövekbe juttatják, és a fehérjéket nehéz körülmények között oldják oldódni SDS-sel, hővel és szonikációval. Ezután eltávolítják a mosószert, és a fehérjéket peptidté emésztik SP3 gyöngyalapú tisztítással vagy aceton-kicsapással. A mély fedettség érdekében a peptidek TMT címkézésen, frakciósításon és MS3-alapú mennyiségzésen esnek át. Nagy kohorsok esetén a címkézetlen peptideket spektrális könyvtár felépítésére használják, és DIA elemzi őket MS2-alapú kvantifikációval, lehetővé téve a szöveti proteomok átfogó, kvantitatív térképezését a vizsgálatokban.

Olyan munkafolyamatoknál, mint a következő generációs szekvenálási könyvtár előkészítése, MALDI-TOF MS mintaelőkészítés vagy FFPE szövetfeldolgozás esetén ez az instabilitás több mint kellemetlenség. Ez a következőkhez vezethet:

•Következetlen DNS-nyírási profilok

• Gyenge reprodukálhatóság operátorok, műszerek vagy helyszínek között

•Extra ismétlések, több fogyasztható felhasználás és késések a projekt idővonalában

Ez az a kihívás, amelynek célja az Ultrasonicator Instrumental megtervezése: a minták valóban hűvösnek és stabilnak tartása, miközben hatékony, fókuszált ultrahangos energiát biztosítanak.

Hogyan tartja az ultrahangú műszerünk a mintákat hidegben egynd Clean

A Longlight Technology fókuszált ultrahangú műszere nem úgy viselkedik, mint egy klasszikus szondarendszer. Ahelyett, hogy egy nagy, egyenetlen vízfürdőn keresztül szórnának energiát – vagy egy fémhegyet közvetlenül a csőbe küldenék – az ultrahangos energiát pontosan arra koncentrálná, ahol szükséged van: magára a mintatartályra.

Érintkezés nélküli feldolgozás a tisztasági munkafolyamatokhoz

A mi rendszerünkben az ultrahanghullámok akusztikus közegen keresztül jutnak el a mintához, anélkül, hogy bármilyen hardver bejutna a csőbe. Ez az egyszerű változás nagy hatással bír:

✅Fém szonda nem érinti a mintát

✅Kisebb esély a keresztszennyeződésre a futások között

✅Csökkent fizikai sérülés kockázata kopott vagy elcsúszott hegy miatt

Ritka klinikai anyaggal vagy korlátozott kutatási mintákkal dolgozó laborok esetében ez a nem érintkezési megközelítés minden mikrolitert véd. A munkafolyamatok könnyebbé válnak szabványosítani, mert eltávolítunk egy jelentős változatossági forrást: az emberi kéz a szondát igazítva és a jégfürdő figyelését.

Igazán alacsony hőmérséklet, nem csupán egy meghatározott pont

Az alacsony hőmérsékletű feldolgozás nem csupán egy jelölőnégyzet a felületen. Attól függ, mennyire tudsz pontosan figyelni és reagálni a hőmérséklet-elsodrásra. Ultrahangú műszerünk egy nagy érzékenységű hőmérséklet-érzékelő és vezérlő rendszert használ, amely folyamatosan követi a mintaterület körülményeit.

Rendszerünk folyamatosan figyeli a mintaterület hőmérsékletét. Egyenletes, izotermikus vízréteget tart fenn a csövek körül. Ugyanakkor aktívan kompenzálja a szonikáció során keletkezett hőt.

Ennek eredményeként a beállított hőmérséklet az a hőmérséklet, amit a mintád ténylegesen lát. Szabadon állíthatod a szonikálás idejét, a munkaciklust és az energiát anélkül, hogy aggódnál a rejtett hőmérsékleti ugrások miatt.

Ez a pontos hőszabályozás különösen fontos az NGS, DNS, RNS és kromatin nyírás esetén. A proteomika munkafolyamatai is előnyösek lehetnek, mivel az érzékeny fehérjék és enzimek továbbra is védettek. Az FFPE deparaffinizáció és szöveti lízis során csökkenti a túlmelegedés kockázatát, amely károsíthatja a szöveti morfológiát és az adat későbbi működését.

A valódi laborokban a munkaterhelés naponta változik – a kis pilot sorozatoktól a teljes gyártási tételekig. Ultrahangszerelő műszerünk mindkét helyzetet támogatja anélkül, hogy platformot cserélne.

Képes vagy:

• Egyszerre egy-egy vagy több mintát futasz el, mindegyiknek saját paraméterei vannak
• Használj kötegi feldolgozást, hogy egyetlen feltételkészletet alkalmazz hasonló mintákra egyetlen beállítással

Ez a rugalmasság lehetővé teszi, hogy néhány mintán új beállításokat validálj, majd azonnal nagyobb adagra skálázd. Csökkenti a kézi programozási lépéseket, és segíti az üzemeltetőket a csapaton belül következetes módszerek követésében.

• Valós laboréletre készült

A mindennapi részletek köré is tervezünk, amelyeket gyakran figyelmen kívül hagynak:

• Csendes működés – A rendszer elég csendesen működik ahhoz, hogy ne legyen szükség extra hangszigetelő dobozokra. Akár közös helyiségekben is, akár egy szabványos labor padján is elhelyezkedhet.

•Integrált vezérlés – Beépített operációs rendszerrel nincs szükség külső számítógépre. Ez helyet takarít meg és csökkenti egy újabb hibás pontot.

• Nyomon követhető folyamatadatok – Az információfeldolgozás akkor érhető el, amikor szükség van rá, így a kísérleti nyilvántartásokban valódi nyomon követhetőség biztosítható.

• Automatikus lefolyósítás – A hulladékfolyadékot egyetlen parancsgal lehet kiengedni, és egy érzékeny vízszint-érzékelő korai figyelmeztetéssel segít elkerülni a véletlen túlcsordulást.

Ezek a funkciók együtt az alacsony hőmérsékletű ultrahangzást megbízható, mindennapi eszközzé változtatják, nem pedig egy különleges, magas karbantartást igénylő lépésré a munkafolyamatban.

A Daily Workflow-tól to Adatminőség: Miért választják a laborok a Longlight-ot

A Longlight Technology-nál az egész mintaelőkészítési folyamatra fókuszálunk, az első csőtől, amit betöltünk, egészen az adatok minőségéig, amit a végén látunk. Ultrahangszerelő műszerünk nem csupán hardver fejlesztése; Ez egy módja annak, hogy a mintakészítésed kiláthatóbbá váljon.

• A fájdalompontok stabil folyamatokká alakítása

Ahelyett, hogy ultrahangenergiát veszítenénk egy nagy vízfürdő alatt, fókuszált kialakításunk hatékonyan irányítja az energiát a mintatartályba. A folyamat egy kontrollált, érintkezésmentes, izotermikus vízkörnyezetben zajlik. A laborod eredménye a következő:

• Stabil és ismételhető akusztikus energia átvitel

• Kevesebb eltérés a különböző mintapozíciók között a hangszerben

• Következetes fragmentáció és homogenizáció DNS-ben, RNS-ben, fehérjékben, sejtekben és szövetekben

Minden egységet gondosan kalibrálnak, hogy a teljesítmény hangszerek között igazosuljon. Ez megkönnyíti a módszerek átadását csapatok között, összehasonlítja az eredményeket különböző helyszínekről, és a projektek méretezését anélkül, hogy újraoptimalizálnánk a nulláról.

Mivel a minták zárt csövekben maradnak ultrahangvizsgálat alatt, a kezelés egyszerű. Feltöltöd a csöveket, kiválasztod vagy létrehozod a módszert, majd elkezded a futást. A tartós mikroorganizmusok, sűrű szövetek és FFPE blokkok mind hatékonyan feldolgozhatók, kevesebb kézi munkaidővel és kevesebb megszakítással.

• Vigye vissza a magabiztosságot a mintakészítésbe

Képzeljük el az alacsony hőmérsékletű szonikálást, ami egyszerűen működik: nincs váratlan felmelegítés, nincs aggodalom a keresztszennyeződés miatt, és nincs szükség kritikus minták újrafuttatására.

Erre van tervezve a Longlight Technology fókuszált ultrahangos műszere. Segít megvédeni a törékeny DNS-t, RNS-t és fehérjéket, miközben magas a áteresztőképességet fenntartja.

Vegye fel a kapcsolatot a Longlight Technology-val, hogy további információkat kérjen vagy élő bemutatót foglaljon, amely a labor munkafolyamatához igazodott.