A megfelelő UV gél képalkotó rendszer kiválasztása tiszta és reprodukálható eredmények érdekében

Ha a sávok halványak, a háttér magas, vagy a képek rosszul vannak kitéve, még egy sikeres elektroforézis vizsgálat is nehéz lehet értelmezni. A képalkotás minősége kritikus tényező az eredmények ellenőrzésében, a minta visszanyerésében, jelentésében, valamint a DNS, RNS vagy fehérje géleket végző laboratóriumok reprodukálható eredményei kísérleteiben.

Az UV gél képalkotó rendszer a következő összetevőkből áll: irányított világítás, fényzáró szekrény, optikai szűrők, érzékeny kamera és elemző szoftver. Ezért nem elég összehasonlítani a kamera felbontását a rendszer eldöntésekor. A vevőnek figyelembe kell vennie az egész képalkotási folyamatot, a festék gerjesztésétől az adatok exportálásáig.

Szóval mi az az UV gél Imaging Rendszer?

Egy UV gélképalkotó rendszert a DNS, RNS vagy fehérje sávok vizualizációjára és dokumentálására terveztek a gélelektroforézis után. Az UV megvilágítás, egy nagy érzékenységű kamera, optikai szűrők és képelemző szoftver kombinálásával a rendszer lehetővé teszi a felhasználók számára, hogy világosan készítsék a zselés képeket, valamint elemezzék a sáv pozícióját, fényerejét és molekuláris méretét. Gyakran használják PCR ellenőrzésben, nukleinsav elektroforézisben, restrikciós emésztési elemzésben és rutinszerű molekuláris biológiai kísérletekben.

Egy zárt képalkotó rendszer lehetővé teszi a kontrollált rögzítést, elemzést, címkézést, tárolást és exportot, ami egyszerű UV néződoboz esetén nem lehetséges. A Gélképalkotó rendszer (GI-200) A Longlight által gyártott Longlight mindezeket a funkciókat egyetlen asztali képalkotó rendszerben egyesíti a mindennapi laboratóriumi képalkotáshoz.

Miért számít a megvilágítás és a foltok kompatibilitása fontosak

Egy jó UV forrás nem feltétlenül a legjobb egy jó kép készítéséhez. Az gerjesztő hullámhossznak megfelelnie kell a kiválasztott foltnak, és egy optikai szűrőnek kell lennie, amely átengedi a kibocsátott fluoreszcenciát. Ez a eltérés halvány sávokat, magas háttérrétegeket vagy hamis különbségeket eredményezhet a sávok között.

A 302 nm-es UV-t sok hagyományos nukleinsav-festékhez gyakran használják, míg más hullámhosszak vagy kék fény előnyösebb lehet a festéktől és az alkalmazástól függően. Fontos, hogy a laboratóriumok megerősítsék a festék kompatibilitását, és ne használjanak egyetlen hullámhosszt minden vizsgálathoz. A Longlight útmutató az UV transzilluminátor kiválasztásához tájékoztat a hullámhosszról, a világítás egyenletességéről és a látóterületről, valamint arról, hogyan befolyásolják az eredményeket.

Értékelés a kamerát Teljes Képalkotó lánc

A megapixeleket a képméretek megjelölésére használják, de nem önmaguk teljesítménymutatók. Az, hogy halvány és erős sávokat lehet rögzíteni ugyanazon a képen, a szenzor érzékenységétől, jel-zaj arányától, valamint a lencse minőségétől, a szűrők kiválasztásától, a dinamikai tartománytól és a megvilágítás egyenletességétől függ.

Ha rutin PCR tesztet végeznek, a tiszta sáv szétválasztása elegendő lehet. Alacsony mennyiségű és félig kvantitatív összehasonlítású minták esetén alacsonyabb zaj és nagyobb dinamikatartomány szükséges. A felhasználóknak kérniük kell, hogy lássák a felhasználó által készített képeket a saját gélrel és folttal, ahelyett, hogy egy felbontási lapra hagyatkoznának.

DNS-védelem during Képalkotás és gél eltávolítás

A nukleinsavak UV-kitett hatása károsodhat, különösen, ha a gél még mindig UV-nak van kitéve a szalagok elvágása során. Ez csökkentheti a klónozás hatékonyságát, vagy hatással lehet az érzékeny lefelé irányuló alkalmazásokra. Ezért a kitettséget minimalizálni kell.

A laboratóriumi rugalmasságot egy olyan rendszer biztosítja, amely két módot kínál: UV és kék fény. Az UV alkalmas jól ismert foltok és rendszeres dokumentáció kezelésére, de a kék fény előnyösebb lehet, ha a gélből származó DNS-t nyernek ki, feltéve, hogy kék-fényhez kompatibilis nukleinsav-festést használnak. További részletekért lásd Longlight Nagy felbontású gélképalkotás és UV-biztonságos géleltávolítási útmutató.

Tedd az UV biztonságot vásárlási követelménynek

A szemeket és a bőrt a közvetlen vagy visszavert UV-sugárzás károsíthatja. Egy zárt képalkotó szekrény UV-blokkoló panelekkel és ajtózárakkal, csökkentheti az UV-sugárzás véletlen kitettségét.

A laboratóriumi eljárások nem helyettesítik a biztonsági funkciókat. Ugyanakkor a felhasználóktól megfelelő személyvédőfelszerelés, képzés, figyelmeztető táblák és dokumentált működési szokások szükségesek. De egy megfelelően megtervezett burok megkönnyíti a helyes viselkedést, és csökkenti a rutin képalkotás során az expozíciót.

A rendszer megfelel a Laboratórium Munkafolyamat

A laboratóriumoknak meg kell határozniuk a kívánt eredményt a kapott képről a vásárlás előtt. Lehet, hogy a tanító labornak gyorsan látnia kell az eredményeket, vagy a szabályozott vagy kutató labor ismételhető beszerzési beállításokat, felhasználói adatokat, jegyzeteket és kereshető fájlokat szeretné.

A munkafolyamat előnyei közé tartozik az automatikus expozíció, automatikus fókuszálás, létrafelismerés, képoptimalizálás, automatikus fájlelnevezés, adatátvitel és audit nyomok. Fontolóra Többfényforrású elektroforézis gélképalkotás a többvizsgálatos labor esetében, ami szintén csökkentheti a különálló műszerek szükségességét.

Próbáld ki a valós Minták!

A bemutató nemcsak egy "laboratóriumi" gélt kell tartalmaznia, hanem szimulálnia a "normális" feltételeket is. Tesztelje a gyenge és erős szalagokat egymás mellett, hasonlítsa össze ugyanazokat a mintasávokat a színpad különböző részein, és az automatikus beállítást egy validált manuális beállítással.

Nézd meg, hogy a rendszer érzékeli-e a halvány sávokat anélkül, hogy az erős sávokat telítené. Vegyük figyelembe a háttér egyenletességét, fókusz konzisztenciáját, az annotáció pontosságát, az exportsebességet és a tisztítás egyszerűségét is. Ezek a tesztek jobban mutatják a valós teljesítményt, mint a specifikációs táblázatos kamerák.

Szabványosítás Imaging Telepítés után

Még a legkompetenzettebb rendszer is felhasználónként változik, ha a felhasználók a foltokokat, expozíciókat, szűrőket és bármilyen más fájlkezelést dokumentálva módosítanak. A laboratóriumoknak minden alkalmazásra specifikus képalkotó technikákat kell fejleszteniük, és a szoftver által biztosított validált beállításokat kell tárolniuk.

A következő rutinellenőrzések ajánlottak: képalkotó felület, világítási kimenet, fókusz, szűrők, tárolókapacitás és biztonsági zár. Hasznos a karbantartási dátumok rögzítése is, mivel ez segíthet megkülönböztetni a műszer elcsúszását a foltos vagy minták előkészítő változásaitól.

Ha már vannak Egy rendszer, mik a jelek annak, hogy ideje újat venni?

A csere indokolt lehet, ha a halvány sávokat folyamatosan kihagyják, egyenetlen a megvilágítás, expozíciós beállítások nem ismételhetők, és/vagy a képfájlokból hiányoznak a metaadat, ami megkönnyíti az átvizsgálást. A folyamatos karbantartási igények és az, hogy a régebbi platformok nem feltétlenül olyan foltállóak, mint az újabbak, szintén növelhetik a régi platform teljes költségét.

Ismételt kísérletek, üzemeltetői idő, biztonsági korlátok és adatkezelési igények alapján kell meghozni a döntést – NEM csak a berendezések korkorát. A fejlesztést fontolóra vevő laboratóriumok képesek hívd Longlightot hogy megvitassák mintáikat, festékeiket, gálájukat és dokumentációs követelményeiket.

Következtetés

A legmagasabb felbontású kamera nem feltétlenül a legjobb UV gél képalkotó rendszer. Ez az a rendszer, amely összehangolja a fényt a foltkémiai összetétellel, elkerüli a sáv telítettségét, megvédi a felhasználót és a mintákat, és következetes felvételeket hagy.

A laboratóriumok mintaalapú bemutatást vagy a munkafolyamatra fókuszáló specifikációs áttekintést használhatnak, hogy olyan platformot válasszanak, amely megbízható eredményeket biztosít az operátorok és a kísérletek között.

GYIK

Q1. Mi a célja az UV gél képalkotó rendszernek?

Az elektroforézis után foltos DNS-, RNS- vagy fehérjegéleket rögzít. A létrehozott képeket ezután elemezik, dokumentálják, összehasonlítják és exportálják.

Q2. Értelme UV-képalkotást használni a DNS visszanyeréséhez?

Használható, de törekedni kell az expozíció minimalizálására, mivel az UV károsíthatja a DNS-t. Géleltávolítás és későbbi klónozás esetén gyakran előnyösebb a kék fényben képezés kompatibilis festékkel.

Q3. Miért halványak a gél szalagok a rögzített képen?

Ez lehet alacsony mintakoncentráció, a folt-fény eltérése, a megfelelő szűrő, a rossz expozíció, a régi fények vagy a magas háttérfény miatt. Az egész optikai beállítást ellenőrizni kell a kísérlet megismétlése előtt.

Q4. Minél több megapixel van egy kamerának, annál jobb a kép, ugye?

Egyáltalán nem, több más tényező is van, mint például érzékenység, zaj, dinamikatartomány, a használt objektívek/szűrők minősége és a megvilágítás egyenletessége. Nézz meg valós fotókat a megapixelek helyett.

Q5. Milyen ajánlott frekvenciát ad egy képalkotó rendszer képalkotó ellenőrzéseire?

A rutinellenőrzéseknek tartalmazniuk kell a képalkotó felület tisztaságát, a megvilágítás egyenletességét, fókuszát, szűrőket, biztonsági zárakat és a kép konzisztenciáját.